Optimierung der Transformation von Milchsäurebakterien
Elektrotransformation zählt zu den am meisten verwendeten Methoden um DNA in bakterielle Wirtszellen einzubringen. Ziel dieses Projektes ist es, optimierte Elektroporationsprotokolle für unsere Lactobacillus und Enterococcus-Stämme bereitzustellen.
Elektrotransformation zählt zu den am meisten verwendeten Methoden um DNA in Zellen einzubringen. Verschiedene Protokolle für die Elektrotransformation verschiedener Milchsäurebakterien wurden publiziert und es zeigte sich, dass nur ausgewählte Stämme mit einer hohen Effizienz transformiert werden konnten. Aufgrund der Stammvariationen ist es notwendig für jeden einzelnen Milchsäurebakterien-Stamm das Elektrotransformationsprotokoll zu optimieren um einen effizienten genetischen Transfer zu erzielen. Die Effizienz der Elektrotansformation ist abhängig von einer Reihe von Faktoren. Dazu zählen die Wachstumsphase in der die Zellen geerntet werden, die Zelldichte, die Zusammensetzung der Wasch- und Elektroporationslösung, der Zusatz von zellwandschwächenden Agentien im Wachstumsmedium sowie elektrische Parameter wie Pulsstärke und –länge.
